Анализ ифа: что значат результаты теста на антитела к коронавирусу

Виды тестов на антитела к коронавирусу

Официально тест на антитела называется ИФА – иммуноферментный анализ. Это один из наиболее эффективных способов диагностики заболевания (текущего или или уже перенесенного).

Этот тест пришел на смену радиоиммунному способу исследования. Новый метод лучше зарекомендовал себя, показав большую точность

Немаловажно и то, что он полностью безопасен для здоровья исследуемого человека

Как делается тест

Тестирование на коронавирус применяет ELISA – модификацию ИФА.

Как выглядят тесты на антитела с разными результатами

Полученный анализ характеризуют два показателя:

• Иммуноглобулины М – наличие этих белков в крови пациента говорит о том, болеет он или нет в данный момент;
• Иммуноглобулины G – выявление антител такого типа позволяет сделать вывод о перенесенной в прошлом коронавирусной инфекции.

Преимущества ИФА-теста на наличие антител к коронавирусу перед анализом ПЦР очевидны. ПЦР — методика полимеразной цепной реакции, когда анализируется только наличие болезни прямо сейчас. ИФА-тесты же показывают и факт уже перенесенного заболевания. Кроме того, они быстрее, проще и результативнее.

А теперь о самом главном. В России зарегистрировали отечественный тест на антитела к коронавирусу

И что важно: уже проведенные в конце апреля исследования в отношении медицинских работников показали, что около 20% уже имеют иммунитет к COVID-19. В ближайшем будущем пройти такой тест сможет каждый житель нашей страны

Рассмотрим детальнее – где это сделать и зачем.

Принцип действия иммунохроматографического теста-анализа

ИХА тест-анализ схема

При погружении теста в физиологическую жидкость она начинает мигрировать вдоль полоски по принципу тонкослойной хроматографии. Вместе с жидкостью движется жидкая фаза тест полоски содержащая антитела с красителем. Если в этой жидкости присутствует исследуемый антиген (гормон, онкологический или инфекционный маркер), то происходит его связывание, как с первым типом антител, так и со вторым. При этом происходит накопление антител с красителем вокруг антител. Визуально накопление антител с красителем проявляется в виде окрашивания тест полоски. Свободные антитела с красителем мигрируют далее вдоль полоски и неизбежно взаимодействуют с вторичными антителами в контрольной зоне, где и наблюдается вторая окрашенная (контрольная) полоса.

К – контрольная полоса

Т – тест зона

ИХА тест на антитела показывает заражен ли человек в настоящее время (IgM) и перенес ли человек инфекцию ранее и получил ли иммунитет к повторному заражению (IgG).

ИХА тест в отличие ИФА (ИХЛА) тестов обычно качественный, а не количественный.

Диагностика

Подозрительным на COVID-19 случаем считается случай, при котором присутствуют:

• признаки острого респираторного вирусного заболевания, бронхита или пневмонии;
• наличие в анамнезе посещения неблагополучных по COVID-19 регионов или стран;
• были тесные контакты с лицами, которые впоследствии заболели (SARS-CoV-2 подтвержден лабораторно).

К вероятным случаям относят лиц с симптомами пневмонии, острого респираторного дистресс-синдрома или сепсиса в сочетании с эпидемиологически неблагополучным анамнезом.

Подтвержденным случаем считается лабораторное подтверждение методом ПЦР инфицирования SARS-CoV-2 независимо от наличия или отсутствия симптомов заболевания.

Диагностика коронавируса основана на:

• Изучении эпидемиологического анамнеза – уточняется, находился ли пациент в течение последних 14 дней до появления симптомов в очаге эпидемии, были ли контакты с лицами, болеющими коронавирусом или ОРВИ.
• Клинической картине заболевания. Проверяется, присутствуют ли признаки дыхательной недостаточности, измеряется содержание кислорода в крови (признак гипоксемии – уровень менее 90% для взрослого при пульсоксиметрии), оцениваются гемодинамические нарушения, гематологические изменения, синдром полиорганной недостаточности (развивается вследствие системного воспалительного процесса организма. Также изучается развернутый анализ крови, который при COVID-19 характеризуется снижением уровня лейкоцитов, лимфоцитов и тромбоцитов. Для оценки тяжести состояния изучают уровень активности печеночных ферментов (АЛТ, АСТ), коагулопатических маркеров, протромбина, МНО, Д-димера, прокальцитонина, пресипсина, СРБ.

Обследование включает:

• Тест на коронавирус, для которого берется назофарингеальный мазок, позволяющий выявить при помощи метода ПЦР антигены к SARS-CoV-2 и других известных возбудителей, вызывающих респираторные инфекции (грипп А и В, парагрипп, аденовирусы, риновирусы, бокавирусы, SARS и MERS, сезонные коронавирусы, метапневмовирусы, респираторно-синцитиальный вирус). Экспресс-тест позволяет выявить антитела к коронавирусу, которые появляются на 3-7 день заболевания, поэтому они используются для предварительной диагностики.
• Общий анализ крови и мочи.
• Биохимический анализ крови.
• Анализ мокроты.
• Рентгенографию органов грудной клетки.

В качестве биологического материала для исследования используют назофарингеальный аспират, промывные воды бронхов, кровь, мочу, мокроту, аутопсийный материал легких. Биообразцы, которые считаются потенциально инфекционными, хранятся при температуре от +2 до +8 в течение суток.

Что такое антитела к коронавирусу

Пример того, как антитела атакуют коронавирус COVID-19

Для своевременного распознавания и уничтожения клеток вредоносных микроорганизмов нашей иммунной системой предусмотрена выработка антител.

Антитела обеспечивают связь с вирусными и бактериальными частицами, которая становится губительна для паразита. Первыми к чужеродному возбудителю стремятся наши специальные клетки – нейтрофилы и макрофаги. Они пытаются поглотить «чужестранца», после чего выделяют на своей поверхности частицы незнакомых ДНК.

Это своего рода защитный механизм, с помощью которого макрофаги передают информацию другим клеткам организма о строении уничтоженного врага. Клетки подбирают особые белки – антитела, способные нейтрализовать антиген. Этот процесс может занимать несколько недель. Если человек перенес заболевание, в его крови можно обнаружить антитела к инфекции. Такую способность организма создавать «клетки памяти» медики всего мира используют в активной борьбе с новой формой вируса — COVID-19, неизвестного до этого человечеству.

Чтобы лучше понимать, как работает иммунная система человека, посмотрите это короткое видео:

Государство не помогло — бизнес берет реванш?

И на этом длинный список причин, по которым для «физиков» увеличивается стоимость анализа COVID-19, не кончается. Наталья Мурзина говорит, что, во-первых, вызванный самоизоляцией провал в доходах частных медцентров и лабораторий еще не преодолен, и даже тенденция к этому не наметилась:

Сейчас в основном люди сдают анализы на коронавирус, они составляют 80 процентов от общего объема. Остальных проблем как будто не существует. По остальным видам исследований мы — на уровне 50 процентов от количества исследований за аналогичный период прошлого года.

Плюс ко всему, частные медцентры, как утверждает Мурзина, не получили обещанных на самом высоком уровне компенсаций за самоизоляцию — ни отсрочек по налогам, ни какой-либо иной государственной поддержки:

— Недавно нам, например, пришел «привет» от налоговой — пени за просрочку платежей во время самоизоляции. Сумма небольшая, но обидно…

Обидно и частным клиентам: выходит, они втридорога платят за себя — и за «просевший» бизнес. И отказаться не могут, справка-то кровь из носу нужна.

Инна Серова

ОбществоМедицинаУслугиБизнесАналитика Татарстан Министерство здравоохранения Республика ТатарстанСадыков Марат Наилевич

Как узнать, есть ли антитела к коронавирусу?

Для исследования у человека берется небольшое количество крови с пальца или из вены и подвергается тестированию на антитела класса G (IgG). Полученный результат оценивается и дает возможность сделать выводы о наличии или отсутствии антител к коронавирусу.

Что показывает тест на антитела к коронавирусу?

В крови человека, болеющего или переболевшего коронавирусом, обнаруживается иммуноглобулин (антитела):

• IgM – болезнь находится в острой стадии;
• IgG – человек перенес заболевание, иммунитет формируется.

В зависимости от наличия того или иного вида антител тест покажет соответствующий результат.

Результаты теста на антитела к Covid-19

Существует пять вариантов интерпретации анализа:

IgM

Тест на антитела к коронавирусу положительный или отрицательный – что это значит?

В зависимости от результата теста определяется дальнейшая тактика работы с пациентом:

Метод ИФА

Метод иммуноферментного анализа (ИФА) по своему принципу довольно прост. Для определения наличия антител в крови используются микропланшеты (пластиковые пластины), покрытые вирусным белком. При попадании на такую пластину крови пациента происходит реакция, дающая возможность выявить наличие или отсутствие в ней специфических антител. Отличается максимальной точностью результата.

Метод ИФА бывает:

• качественным — ответ подразумевает наличие или отсутствие искомого вещества в образце, дает ответ болел человек или нет, как давно болел;
• количественным (полуколичественный) — позволяет не только определить болел или нет, но и дает оценку концентрации антител в крови пациента. Это позволяет выяснить, насколько сильно отвечает иммунитет на вирусное заражение, может ли человек стать донором антител.

Для анализа берется кровь из вены. Результат будет известен через 1-3 дня. Для проведения исследования требуется специальное оборудование.

Метод ИХЛА

Расшифровывается, как иммунохемилюминесцентный анализ, тестирование ИХЛА является модификацией ИФА. Он более чувствителен к специфическим антителам, точность анализа составляет 90 %. Антитела определяются иммунной реакцией антигена с антителом. Для получения результата необходимо дополнительное оборудование.

Метод ИХА

Иммунохроматографический анализ (ИХА) относят к экспресс-тестам. Результат можно оценить уже через 15 минут. Метод не требует никакого оборудования и тестирование может проводиться в любых условиях. Принцип определения аналогичен тестам на беременность: используются полоски, кассеты или панели.

Этот вид анализа основан на разделении частиц методом парной связки и реакции между антителом в биоматериале пациента и антигеном. Берется кровь из пальца.

Экспресс-тесты на антитела методом ИХА — проводится по принципу глюкометра. По капле крови можно определить имеется или нет в крови специфический белок. Чтобы определить количество или скорость увеличения концентрации, потребуется проведение дополнительных исследований.

Результат качественный: есть или нет антитела IgM и IgG.

Подробнее

Зачем сдавать тесты на антитела

Новые способы обследования вызывают желание у всех тех, кто переболел осенью и зимой подозрительными ОРВИ и бронхитами, сдать анализ и ответить на главный вопрос: есть ли иммунитет к SARS-CoV-2? Но здесь стоит помнить, что пока еще нет однозначного ответа на вопрос, сколько сохраняется защитный эффект.

Проведение ИФА-теста помогает ответить на следующие вопросы:

• есть ли риски заразиться у медицинских сотрудников и людей, выполняющих жизнеобеспечивающую работу (продавцы, водители, таксисты, полицейские и т.д.);
• насколько эффективна вакцина;
• каковы реальные цифры переболевших;
• кто может стать донором и помочь в лечении больных COVID-19.

Полученные в ходе такого глобального обследования данные станут основанием для принятия решений в части продления или снятия ограничительных мер. Стоит ли конкретно вам бежать сдавать тест — в разборе ситуации от meduza.io.

? Расшифровка результата

В настоящее время на основе лабораторных испытаний известны три типа результатов тестов на наличие антител к коронавирусной инфекции:

• Ig(M)³1, Ig(G) имеет любое значение. Такой результат говорит о том, что у человека в настоящее время идет активная фаза заболевания данной инфекцией;
• Ig (M) < 1, Ig (G) ³ 10. Данный вариант показывает, что человек уже ранее переболел инфекцией, а сейчас у него происходит формирование иммунитета. Он не опасен для окружающих, но при этом ему следует опасаться повторного заболевания;
• Ig (M) < 1, Ig (G) < 10. Этот результат означает, что человек не является инфицированным, но и не переболел коронавирусом ранее. Это означает, что ему необходимо опасаться риска своего первичного инфицирования.

Положительный и отрицательный результаты

В зависимости от того, что показывает наличие иммуноглобулинов М и G в крови тестируемого, можно ответить на вопрос о том, в какой стадии находится человек, и является ли он носителем данного инфекционного заболевания. Именно в зависимости от наличия указанных иммуноглобулинов тест может расцениваться, как положительный или отрицательный.

Так как иммуноглобулины типа М показывают именно острую фазу течения инфекции, данный тест на антитела может расцениваться, как дополнительный источник информации в отношении диагностики фактического наличия у человека заболевания коронавирусом.

То есть если тест является положительным (присутствуют либо все типы иммуноглобулинов, либо иммуноглобулины типа М), то его результаты могут быть истолкованы и как результаты теста на коронавирус.

Образец бланка с результатами теста на антитела

Набор реагентов для выявления РНК SARS-CoV-2 методом петлевой изотермальной амплификации Изотерм SARS-CoV-2 РНК-скрин по ТУ 21.20.23-069-26329720-2020

Сведения из Государственного реестра медицинских изделий:

Уникальный номер реестровой записи
48459
Регистрационный номер медицинского изделия
РЗН 2020/9957
Дата государственной регистрации медицинского изделия
26.11.2020
Наименование медицинского изделия
Набор реагентов для выявления РНК SARS-CoV-2 методом петлевой изотермальной амплификации «Изотерм SARS-CoV-2 РНК-скрин» по ТУ 21.20.23-069-26329720-2020в составе: Компоненты: «К+» – положительный контроль — 1 пробирка (100 мкл), «К-» – отрицательный контроль — 1 пробирка (100 мкл), «РС» – реакционная смесь — 1 пробирка (1,5 мл), «Фермент» – Bst-полимераза — 1 пробирка (130 мкл), «Лизирующий буфер» – 1 флакон (12,0 мл), Планшет 96-луночный для проведения ПЦР — 1 шт., Пленка для запаивания планшета 96-луночного — 1 шт. Эксплуатационная документация: Инструкция по применению набора реагентов — 1 шт.
Наименование организации — заявителя медицинского изделия
АО «ГЕНЕРИУМ»
Место нахождения организации-заявителя медицинского изделия
601125, Россия, Владимирская область, Петушинский район, п. Вольгинский, ул. Заводская, стр. 273
Юридический адрес организации-заявителя медицинского изделия
601125, Россия, Владимирская область, Петушинский район, п. Вольгинский, ул. Заводская, стр. 273
Наименование организации-производителя медицинского изделия или организации-изготовителя медицинского изделия
АО «ГЕНЕРИУМ»
Место нахождения организации-производителя медицинского изделия или организации — изготовителя медицинского изделия
601125, Россия, Владимирская область, Петушинский район, п. Вольгинский, ул. Заводская, стр. 273
Юридический адрес организации-производителя медицинского изделия или организации — изготовителя медицинского изделия
601125, Россия, Владимирская область, Петушинский район, п. Вольгинский, ул. Заводская, стр. 273
Код Общероссийского классификатора продукции для медицинского изделия
21.20.23.110
Класс потенциального риска применения медицинского изделия в соответствии с номенклатурной классификацией медицинских изделий, утверждаемой Министерством здравоохранения Российской Федерации
3 (медицинские изделия с высокой степенью риска)
Вид медицинского изделия в соответствии с номенклатурной классификацией медицинских изделий, утверждаемой Министерством здравоохранения Российской Федерации

Адрес места производства или изготовления медицинского изделия
1. АО «ГЕНЕРИУМ», Россия, 601125, Владимирская область, Петушинский район, п. Вольгинский, ул. Заводская, стр. № 263.2. АО «ГЕНЕРИУМ», Россия, 601125, Владимирская область, Петушинский район, п. Вольгинский, ул. Заводская, стр. 273.3. ООО «Медико-биологический Союз», Россия, 630090, г. Новосибирск, ул. Инженерная, д. 16.

«Ждите ответа»

С вопросом, откуда же берется такая большая разница в цене для частных клиентов и госзаказчиков «Реальное время» обратилось в пресс-службу «Ситилаба», чье коммерческое предложение от 26 июня, направленное в адрес министра здравоохранения РТ Марата Садыкова, оказалось единственным. «Реальное время» направило запрос в сеть лабораторий в минувшую пятницу. В понедельник в компании пообещали предоставить ответ через несколько дней, объяснив промедление загруженностью специалистов другими задачами. По получении он будет опубликован.

В Минздраве РТ также пока не ответили на наш запрос касательно реальной стоимости работ по лабораторным исследованиям на COVID-19. Ответ ведомства мы также готовы опубликовать.

«Чем больше — тем дешевле»

В отсутствие объяснений со стороны господрядчика и госзаказчика наше издание попыталось найти объяснение этого невероятного демпинга у экспертов.

— Я не в курсе тарифов по госконтрактам на лабораторные исследования на COVID-19, — ответила гендиректор лечебно-диагностического центра «Биомед» Римма Гизатуллина на вопрос «Реального времени», откуда может взяться такая грандиозная разница между ценой одного и того же исследования по госконтракту и для частных клиентов. Но зная, что от объема зависит себестоимость анализов, я могу предположить, что цена там может быть ниже, чем в нашей компании.

Гизатуллина добавила, что крупная федеральная сеть лабораторий может позволить себе снижать тарифы, зарабатывая на больших объемах работ, а вот небольшая местная компания такой возможности не имеет:

— Мы выполняем всего порядка 282 тестов ежедневно. А чтобы при таком низком тарифе затраты лаборатории окупались, необходимо делать от тысячи анализов в день.

ИФА

ПЦР-тест-системы, как и КТ-диагностика выявляет COVID-19 в острой фазе. Однако весьма актуальна и информация об уже переболевших, на основании которой можно судить об охвате населения заболеванием, а также о числе бессимптомных случаев. Ответы на эти, а также на многие другие вопросы, может дать тест-система на антитела. На сегодняшний день разрабаткой таких тест-систем помимо «Вектора» занимаются такие организации как «Вектор-Бест», ООО «НПО «Диагностические системы», ФНКЦ ФХМ ФМБА России, «МБС-Технологии», а также «Генетико» и Институт молекулярной биологии РАН . К сожалению, тест-системы на антитела требуют намного больших усилий и времени на разработку, чем ПЦР-системы, а их чувствительность и специфичность оставляет желать лучшего. Так, проведенное в США исследование доступных система на антитела показало, что лишь 3 из 14 систем дают надежные результаты (т.е. не более 1% ложноположительных результатов), но при этом их чувствительность не превышает 90% относительно положительных контрольных образцов []. Какова будет чувствительность и специфичность разрабатываемых российских систем — пока неизвестно.

Сделаем краткие практические выводы:

В первые пять дней болезни — ПЦР-диагностика будет достаточно эффективна
Идеальный вариант — тестирование с выездом на дом в тех лабораториях, которые используют системы с контрольными образцами,  о чем мы писали выше. 

Если тест дал отрицательный результат или прошло больше пяти дней от начала болезни, а симптомы сохраняются, то в этом случае поможет с диагностикой КТ; при этом пациентам важно напомнить о соблюдении всех меры предосторожности при нахождении в медицинских организациях. 

Проводить ИФА при текущей низкой точности — едва ли имеет смысл. 
Если симптомов нет, но был контакт, в принципе можно пройти ПЦР-диагностику, но лучше всего на 14 дней уйти на самоизоляцию и наблюдать за самочувствием.. Парадоксальным образом, нам известны истории, когда самих врачей, контактных по COVID-19, тестируют далеко не всегда и на самоизоляцию никто не отправляет
Вопросы финансирования диагностики и конечно кадровой политики (кто вообще останется работать?) не решены

Поэтому, еще раз напоминаем о важности соблюдения всех профилактических мер при контакте с пациентами

Парадоксальным образом, нам известны истории, когда самих врачей, контактных по COVID-19, тестируют далеко не всегда и на самоизоляцию никто не отправляет. Вопросы финансирования диагностики и конечно кадровой политики (кто вообще останется работать?) не решены

Поэтому, еще раз напоминаем о важности соблюдения всех профилактических мер при контакте с пациентами

Отвечаем на вопросы о системе НМиФО в прямых эфирах Вконтакте: https://vk.com/medznanie_ru 

Обсудить последние новости со всеми коллегами России вы можете в чатах:

• WhatsApp: https://chat.whatsapp.com/Izj3ZQ7aI36KK8e2dCjcm4
• Telegram: https://tglink.ru/joinchat/GWBPCkkLipQUnTbXrKqzGA

Регистрируйся на нашем сайте и получай доступ к актуальным образовательным вебинарам

Также читайте статьи: Каким будет сценарий эпидемии COVID-19 в РФ (графики для РФ, Италии, Южной Кореи и США), Правда и мифы о коронавирусе (COVID 19), Вопрос жаропонижающих при коронавирусе: только не НПВП или почему бы и нет?

Виды антител человека

У млекопитающих, то есть и у человека тоже, существует 5 классов антител, которые получили свое название по типу тяжелых цепей:

• IgA — антитела этого класса в основном обнаруживаются в секретах нашего организма. Их можно найти в слюне, слизи, вырабатываемой в носу, в грудном молоке, в пищеварительном соке. В плазме крови их относительно немного – всего 10-15% от общего объема всех Ig. Это – наша первая линия защиты слизистых оболочек. Сами по себе IgA не имеют бактерицидных свойств, то есть не уничтожают бактерии, но они нейтрализуют токсины, которые эти бактерии вырабатывают. Они также активируют защитную иммунную реакцию организма на вторжение вирусов. Именно IgA обеспечивают специфический иммунитет новорожденных, который те получают с молоком матери.
• IgE – об этих антителах знают все аллергики. Именно эти Ig играют ведущую роль в развитии аллергической реакции, которая является проявлением гиперчувствительности иммунной системы. У аллергиков показатели IgE могут быть в 10 раз выше, чем у обычного человека. А еще IgE отвечают за иммунную реакцию на глистов. Концентрация IgE также возрастает при некоторых аутоиммунных заболеваниях, таких как псориаз или ревматоидный артрит.
• IgM – вот это очень интересный класс антител, актуальный по нынешним временам. Когда патогенный организм проникает в тело, именно эти иммуноглобулины образуются в первую очередь. Это самые тяжелые Ig из всех. Они образуют пентамеры из пяти Y-образных белковых молекул. Их вариабельные области на торчащих наружу раздвоенных хвостах Y-белков сравнивают с набором деталей из конструктора, из которых можно выстроить любую конфигурацию. Именно такая уникальная конфигурация образуется при контакте IgM с поверхностными белками вируса или бактерии. Если в крови человека много IgM, например, к коронавирусу, это значит, что инфекция на ранней стадии — человек болен.
• IgD — иммуноглобулинов этого вида в плазме крови мало, порядка 0,25% от общего объема Ig. Ученые считают, что IgD работают вместе с IgМ, дополняя их функционально.
• IgG — самые важные для нас антитела в свете пандемии коронавируса. Антител этого класса в крови больше всего – 75%, и это главный тип иммуноглобулинов. Они связываются с патогенами, попавшими в тело, и тем самым приводят к их иммобилизации и агглютинации. Когда на поверхность вируса, бактерии, грибка усаживаются IgG, эти агрессоры попадают в поле зрения клеток иммунной системы фагоцитов, которые распознают вредителя и уничтожают его. IgG не только определяют врагов, они также запускают систему комплемента, что приводит к образованию белков, необходимых для уничтожения патогенных микроорганизмов. IgG также нейтрализуют токсины. Они также содержатся в материнском молоке и даже могут проникать сквозь плаценту, обеспечивая ребенку защиту как до родов, так и в первые месяцы жизни после них. Наличие IgG к определенной инфекции в плазме крови говорит о том, что организм уже не только познакомился с инфекционным агентом, но и уже научился с ним бороться.

Итак, при иммуноферментном анализе (ИФА) анализируется наличие антител IgM и IgG. Если в плазме крови есть только антитела IgM, это значит, что человек заболел недавно и болеет на данный момент. Если есть и IgM, и IgG, это значит, что борьба с инфекцией в разгаре и иммунная система уже вырабатывает необходимые для уничтожения вируса или бактерии антитела. Если же в плазме крови определяются только IgG, это значит, что инфекция была, но организм ее успешно победил, вылечился, но все еще помнит, как с ней бороться.

Для тех, кто задается вопросом о том, сколько же вариаций антител может существовать и не закончатся ли эти варианты на протяжении жизни одного человека, уточним, что ДНК, которая кодирует вариабельные участки антител, содержит 400 вариабельных генов, 12 генов разнообразия и 4 соединительных гена. В разных комбинациях они позволяют закодировать более 200 тысяч разновидностей вариабельных областей. И это – не считая изменений нуклеотидов самих генов. По расчетам ученых, человеческий организм может произвести 100 млн разных антител, которые способны распознать практически любые существующие вещества, являющиеся для нас чужеродными. Этого за глаза хватит любому, даже очень активно контактирующему с инфекциями человеку.