Тест на коронавирус методом пцр в инвитро: стоимость

Китайские тест-полоски Bioeasy

Это еще один экспресс-тест, созданный в Китае и выявляющий антитела в крови. Принцип действия такой же, как у голландской тест-системы. Специальным инструментом – скарификатором – прокалывается палец, и кровь наносится в выемку.

При обнаружении иммуноглобулинов (антител) появляются 2 или 3 полоски, соответствующие IqM и/или IgG. Если полоска только одна, то возможно 2 варианта – человек абсолютно здоров или болезнь еще не проявилась, так как прошло меньше 5 дней.

Тесты Bioeasy не прошли проверку практикой, так как чувствительность большинства из них составила лишь 30% против заявленных 80%. Это выяснилось в ходе их использования в Испании, власти которой закупили 340 тыс. экспресс-тестов.

«Они не выявляют положительные случаи», – отметил один из экспертов, участвовавших в тестировании с помощью продукции Bioeasy в Испании

Представители китайского посольства в ответ на претензии заявили об отсутствии лицензии на продажу медицинских тест-систем у компании Bioeasy. В официальном сообщении говорится: «компания Shenzhen Bioeasy Biotechnology пока не получила официальную лицензию от Национальной администрации лекарственных средств Китая на продажу своей продукции».

Последние новости

8 апреля 2020 г. премьер-министр России М. Мишустин заявил о намерениях правительства расширить численность лабораторий для выявления коронавируса. Такую возможность получат и государственные медучреждения, и частные клиники, которые планируют заняться диагностикой Covid-19.

Благодаря данному распоряжению тестирование уже запустили многие платные организации и лаборатории – в частности, ЛабКвест, СитиЛаб и Семейный доктор.

10 апреля 2020 г отечественный научный центр Вектор зарегистрировал первую российский анализатор Sars-CoV-ИФА-Вектор, определяющий антитела к коронавирусу методом иммуноферментного скрининга. Его результаты позволяют установить, перенес ли человек заболевание. Запуск тестирования по этой методике планируется на конец апреля.

Тестирование на коронавирус в России не является обязательной процедурой для здоровых людей, если типичные симптомы заражения отсутствуют. Поэтому вопрос о прохождении обычного или экспресс-теста решается каждым человеком индивидуально.

Почему ПЦР-тест пока не спас мир

В настоящее время ПЦР-тесты остаются самыми чувствительными к коронавирусу. В Южной Корее и Новой Зеландии их широкое применение помогло подавить инфекцию, указывает автор публикации в Nature. Однако этот успех не удалось повторить в других странах. Согласно той же статье, в США не удалось добиться их эффективного использования из-за плохой координации, партий некачественных тестов и сложностей с поставками.

Оперативность ПЦР-теста невелика, в лучшем случае он займет несколько часов, в реальной жизни в случае плохого сценария результаты можно ожидать несколько дней. Гипотетически, человек, у которого реакция ПЦР не обнаружила коронавирус, может быть уже инфицированным на момент получения результата анализа. Проведение анализа требует специальной лаборатории и обученных специалистов, то есть, он ресурсоёмкий.

Затрудняет массовое тестирование и сравнительно высокая цена теста. В Москве его проведение на дому может стоить более 5000 рублей.

Необходимость и условия проведения

Полимеразная цепная реакция как метод диагностики рекомендована тем, кто входит в группу контактных лиц, болен пневмонией. Граждане пожилого возраста, хронически больные другими заболеваниями (с ослабленной иммунной системой), те, кто обнаружил у себя признаки простуды, после посещения мест, представляющих потенциальную опасность заражения, а также прошедшие курс лечения от COVID-19, для подтверждения факта выздоровления могут обращаться за бесплатным тестированием в государственные медучреждения и не только в Москве.

На платной основе делается тест в сети лабораторий Инвитро, широко распространенной в России. Здесь цена составляет 440 рублей.

Перед сдачей ПЦР-теста на COVID-19 нужно не принимать ни алкоголь, ни антимикробные препараты (за сутки до назначенного времени). За два часа до взятия мазка не рекомендуется есть и пить, курить или чистить зубы, пользоваться любыми освежителями ротовой полости, полосканиями, ингаляторами и принимать лекарства.

Итоги

Полимеразная цепная реакция – прогрессивный и технологичный метод, применение которого в диагностике крайне важно. Он позволяет выявить даже незначительное количество вирионов и начать лечение на раннем этапе заболевания

Где и когда может потребоваться справка об отсутствии коронавируса?

Во-первых, справка может потребоваться при выезде за границу — в страну, с которой Россия возобновила авиасообщение. Например, справка может понадобиться при вылете в Египет, Мальдивы, Объединенные Арабские Эмираты, Киргизию, Казахстан, Южную Корею и другие страны, с которыми Россия возобновит авиасообщение.

Как правило, справка нужна на английском языке, или на языке страны, в которую предстоит лететь. Это должны быть результаты ПЦР-теста в виде сертификата с печатью лаборатории.

Каждая страна устанавливает свои правила — очень важно перед путешествием узнать обо всех тонкостях. Например, многие страны могут требовать справку с условием, что анализ был сделан за 48 или 72 часа до прилёта в страну

Именно сам анализ, а не получение справки о проведенном тесте!

ПЦР на ковид, как подготовиться к сдаче

Важно понимать, что точность результата анализа на ковид методом ПЦР зависит от множества параметров. В каждом цикле цепной реакции чувствительность может быть разная

ПЦР определяет не наличие или отсутствие ДНК коронавируса, а количество этой ДНК в отобранных пробах. Если за разумное количество циклов ДНК не определена, тест будет отрицательным. Если на последних циклах есть амплификация, но она ниже, установленного для положительного результата, значения, то результат теста также будет отрицательным.

Для объективного результата, перед отбором проб, нужно соблюсти следующие условия.

• не полоскать горло непосредственно перед взятием мазка
• не пить за 2-3 часа
• не орошать зев менее чем за 2 суток до взятия проб
• за 10-14 дней до взятия мазка на ковид перестать капать гриппферон и не принимать другие интерфероны

При несоблюдении этих условий ПЦР диагностика будет не качественной и не отразит реальную картину.

Бывают ли ложноположительные тесты

Ложноположительные тесты ПЦР встречаются редко. Частота погрешности, когда обнаруживают РНК коронавируса, а потом это не подтверждается другими методами диагностики, не превышает 0,7-1,2%

Важно учитывать, если человек даже хорошо себя чувствует, то он может быть заражен коронавирусом, а также становится опасным для окружающих. Чаще бывают ложноотрицательные (24-78% в зависимости от метода), то есть человек болен, но тест из-за погрешности взятия материала (соскоба из носоглотки) его не показывает

Экспресс-тесты еще менее надежны, так как антитела в количестве, доступном для выявления, обнаруживают не раньше 5 дня болезни, а максимальный уровень отмечается только на 10 сутки. Поэтому по одному результату диагноз не ставят, исследование повторяют, учитывают данные рентгенографии (томографии), других анализов крови. Есть случаи, когда потвердеть коронавирус удалось только с 5 раза.

По рекомендации Департамента здравоохранения Москвы, человеку без симптомов нужно пройти тестирование 2 раза, а при наличии температуры, кашля, боли в горле или других подозрительных на заражение симптомов необходимо минимум 3 теста.

Особенности ПЦР-исследования

Метод полимеразной цепной реакции, как расшифровывается ПЦР, обладает высокой чувствительностью и определяет в образцах пациента любые типы инфекций – грибы, вирусы, бактерии.

Для лабораторного исследования можно брать любую биологическую жидкость, где могут обнаруживаться чужеродные микроорганизмы: слюну, мочу, кровь. Однако чаще всего производится забор промывных вод бронхов и мазка из носоглотки, причем последняя процедура проще.

Взятые пробы обрабатываются специальным реагентом для выделения фрагментов вирусного РНК. Затем эти фрагменты многократно увеличиваются с помощью фермента полимеразы и воздействия низкочастотных токов. В итоге чужеродные молекулы становятся видимыми для тест-систем.

Благодаря высокой чувствительности методика ПЦР обеспечивает достаточно точные результаты даже при малых концентрациях вирионов – вирусных частиц – в образцах и отсутствии клинических симптомов заболевания.

ПЦР-тестирование – это качественный метод, дающий однозначный ответ на вопрос: болен человек или здоров. С его помощью нельзя определить, насколько давно произошло заражение, сколько вируса в организме, и на какой стадии находится болезнь. Для этого есть другие способы диагностики – в частности, анализы на антитела.

Чем уникален ПЦР-тест

Коронавирус Sars-CoV-2, как и другие респираторные инфекции, попадает в человеческий организм через слизистые глаз, носовой и ротовой полости. Он прикрепляется к мембранным рецепторам клеток посредством вирусных шипов, и наиболее уязвимыми являются дыхательные пути, мочевыделительные и пищеварительные органы. На их внутренних поверхностях имеются ферменты АПФ2 и АСЕ2, с которыми и связываются вредоносные частицы.

В первые дни после проникновения коронавирус активно клонируется в эпителии, выстилающем носоглотку, поэтому обнаруживается в слюне и муконазальном секрете. Вирусоносители, сами не зная о том, распространяют инфекцию при кашле, чихании, смехе и разговоре. Причем даже при отсутствии симптомов они могут заражать окружающих.

Если пришлось контактировать с ковидным больным, рекомендуется как можно скорее промыть нос, рот и глаза хотя бы водой

Определить, что человек болеет именно Covid-19, может только ПЦР-тест, поскольку симптомы, особенно на ранних стадиях, практически не отличаются от простуды.

В крови и лимфатической жидкости коронавирус не циркулирует, поэтому материал для исследования берут из носоглотки. Точность анализа не превышает 80%, и вероятность получения неверных результатов достаточно велика.

Кроме того, на слизистых вирус долго не держится, подвергаясь атакам иммунных клеток и смываясь слюной. Следовательно, целесообразно повторять анализ несколько раз, особенно при наличии явных симптомов, а также дополнять его тестом на антитела.

Настройки противовирусной защиты

Гепатит, как отмечают ученые, не взаимодействует с ACE2 напрямую, однако после развития инфекции уровень активности этого рецептора меняется, так как он связан со многими компонентами врожденной иммунной системы клеток. Руководствуясь подобной идеей, биологи проследили за тем, как менялось поведение молекул ACE2 в клетках двух сотен кусочков живой ткани, которую извлекли из печени носителей гепатита C.

Эти изменения биологи сопоставили с тем, как различались наборы мелких мутаций в геномах этих клеток, а также с тем, как изменилась концентрация других белков, потенциально связанных и с ACE2, и с врожденным иммунитетом. Этот анализ указал на то, что различия в активности «пособника» SARS-CoV-2 были в первую очередь связаны с двумя генами врожденной иммунной системы, IFNL3 и IFNL4.

В свою очередь, их поведение зависело от того, как был устроен другой участок ДНК, который расположен на 19-й хромосоме человека. В этом сегменте генома, который биологи назвали «регионом IFNL», может находиться три разных типа мутаций. Они значительно меняют то, как организм реагирует на проникновение любого типа вируса в организм.

«Крайне важно узнать, как вариации в регионе IFNL влияют на развитие инфекции в реальных тканях легких. Это особенно важно в контексте того, что мутации в этой части генома встречаются с неодинаковой частотой среди представителей разных этнических групп, что может влиять на характер распространения COVID-19 и смертность от вируса», – пишут ученые

Одна из них значительно понижала количество молекул ACE2, которые вырабатываются в ответ на проникновение вирусов в клетки печени, тогда как две других не препятствовали этому. Это было связано с тем, что обе этих «опечатки» в ДНК приводили к тому, что ген IFNL4 полностью отключался и не участвовал в борьбе с вирусной инфекцией.

Что интересно, степень различий в уровне активности ACE2, которая связана с мутациями в участке IFNL, наиболее ярко проявлялась среди молодых людей и почти не влияла на концентрацию этого белка в клетках пожилых больных. Это, как считают исследователи, может частично объяснять то, почему некоторые молодые люди умирают от COVID-19, тогда как другие переносят болезнь почти без симптомов.

Подобные генетические различия, как считают авторы статьи, нужно учитывать при лечении отдельных пациентов, а их распространенность по всей популяции следует принимать в расчет при прогнозировании хода коронавирусной инфекции.

Следует добавить, что статью ученых не рецензировали независимые эксперты и редакторы научных журналов, как это обычно бывает в подобных случаях

Поэтому к выводам из нее и аналогичных статей следует относиться осторожно

Где сдать тесты на коронавирус тем, кто едет за границу?

Чаще всего для поездок за рубеж просят предоставить отрицательный ПЦР-тест, сделанный не позднее, чем за 72 часа до вылета.

ВАЖНО: тест на коронавирус для выезда за границу – это отдельная услуга, обычный ПЦР-тест на таможне или в аэропорту у вас не примут. TUT.BY пишет, что ПЦР-исследования на наличие COVID-19 для выезда из страны можно сделать в:

• Республиканском центре гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья;
• РНПЦ эпидемиологии и микробиологии;
• Брестском областном центре гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья;
• Витебском областном центре гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья;
• Гомельском областном центре гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья;
• Гродненском областном центре гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья;
• Минском областном центре гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья;
• Могилевском областном центре гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья;
• Минском городском центре гигиены и эпидемиологии.

Сдать анализ для выезда за рубеж будет немного дороже, чем обычный ПЦР-тест: в Республиканском центре гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья тест стоит 45,11 руб. (для иностранцев – 60,36 руб.), в РНПЦ эпидемиологии и микробиологии – 41,32 руб. для белорусов и 48,47 руб. для граждан других стран.

Важно! Для такого исследования у вас могут попросить не только паспорт, но и копию билета или другого документа, подтверждающего выезд. Учтите, что сделать тест сразу не получится

Например, в Минском городском центре гигиены и эпидемиологии исследование выполняют только по предварительной записи. На момент написания этого материала (6 октября) ближайшая доступная запись была на 4 ноября

Учтите, что сделать тест сразу не получится. Например, в Минском городском центре гигиены и эпидемиологии исследование выполняют только по предварительной записи. На момент написания этого материала (6 октября) ближайшая доступная запись была на 4 ноября.

Кто производит

В России тесты на коронавирусную инфекцию, вызванную SARS-CoV-2, производит Центр вирусологии «Вектор», он поставляет около 500 000 систем в неделю. Они идут в государственные лабораторные учреждения и частные – «Хеликс» и «Гемотест».

С конца марта 2020 года используется и японский экспресс-тест на коронавирус, его выпускают Mirai Genomics и российское предприятие «Генетические технологии». Усовершенствованными тест-системами лаборанты могут за 30 минут одновременно провести диагностику у 20 человек.

Центр стратегического планирования Минздрава России также выпустил свою систему – Амплитест SARS-Cov-2, серийный выпуск начат в конце марта 2020 года. Продукция поступает в лаборатории «Инвитро» и больницы Москвы. На разных стадиях исследования и производства находятся еще 10 видов тестов российских предприятий.

• Bosch производит в Германии диагностическую систему Vivalytic, она может выявить возбудителей коронавирусной, гриппозной инфекции и ряда других болезней дыхательных путей;
• Великобритания разработала быструю систему тестирования при помощи ПЦР для экстренного выявления SARS-CoV-2;
• калифорнийской фирмой Cepheid выпускаются тест-системы, помогающие поставить диагноз примерно за 45 минут.

Активные исследования в диагностике коронавируса проводятся также во Франции, Южной Корее.

О точности диагностики

В России одобрены к использованию десятки тест-систем для выявления коронавируса. Ключевые характеристики — диагностические специфичность (точность) и чувствительность. Первый параметр показывает способность набора определить конкретный вирус. Второй — возможность обнаружить его части, даже если в биоматериале их очень мало. «Чем эти параметры ближе к ста процентам, тем лучше», — подчеркивает Тамара Силкина.

«Порог чувствительности — общий как для российских, так и для зарубежных тестов: 10³ на миллилитр. То есть должно быть не менее тысячи вирусных геном-эквивалентов на миллилитр образца. «ДНК-технология» заявила о чувствительности 10¹ — десять вирусных единиц на миллилитр. Другой важный показатель — воспроизводимость, то есть возможность получить одинаковый результат в разных условиях. Нужно учитывать и сходимость — отсутствие существенных различий между измерениями, выполненными в одинаковых условиях», — добавляет медик.

Метод ПЦР с обратной транскрипцией хорошо отработан и практически полностью автоматизирован. С момента попадания в лабораторию анализ занимает четыре-шесть часов. В мире эти тесты буквально поставили на поток. Только в Москве, по официальным данным, сделали 12 миллионов анализов.

Поскольку этот метод прямо выявляет возбудителя в организме, его относят к доказательной медицине и рекомендуют учитывать в клинической практике. Однако анализ больших данных говорит, что при массовом использовании ПЦР-тесты часто промахиваются.

Ложнонегативные результаты получаются в 20-66 процентах случаев. Такие данные из литературы приводят исследователи из Сеченовского университета. Вместе с зарубежными коллегами они изучили записи пациентов, госпитализированных в университетскую клинику в апреле — мае. Из 3480 человек, чьи ПЦР-тесты были доступны, примерно половина оказались чистыми. В то же время клиническая картина и КТ легких указывали на коронавирусную инфекцию. Авторы допускают, что в реальной клинической практике ПЦР-анализ не столь и критичен.

«Этиологическая диагностика, которая выявляет причину заболевания, нужна априори, — не соглашается Айрат Мавзютов, заведующий кафедрой фундаментальной и прикладной микробиологии, профессор кафедры лабораторной диагностики Башкирского государственного медицинского университета, руководитель Исследовательского центра «Лаборатория». — При вирусных инфекциях других, сравнимых по чувствительности и специфичности (точности), методов, кроме ПЦР-тестирования, нет».

Важно понимать, объясняет профессор Мавзютов, что клинический диагноз опирается на субъективные данные — анамнез (опрос) и осмотр пациента. На их основании невозможно установить вирусную природу заболевания и тем более какой именно возбудитель его вызвал

Для этого проводятся лабораторные исследования. Получаемые при этом данные, продолжает ученый, намного объективнее, поскольку большинство современных методов лабораторных исследований автоматизировано. Соответственно, на результаты не повлияют случайные факторы: уровень подготовки специалистов, их настроение, «погода в доме» и так далее.

«Диагноз COVID-19 можно поставить, только когда в материале от больного обнаружили РНК вируса SARS CoV-2 методом ПЦР или же антигены этого вируса иммунохимическими методами. Не выявив следов вируса в организме, нельзя говорить о «ковидной» природе заболевания или летального исхода», — утверждает Айрат Мавзютов.

Он обращает внимание на еще один аспект. ПЦР-тест не отличает РНК вируса, способного к репродукции, то есть размножению, от обломков «нежизнеспособных» вирусных частиц

Он лишь позволяет понять, присутствует или нет РНК коронавируса в клетках.

«Пока инфицированные клетки не заменятся на новые, а на это уходит от двух до четырех недель, не исключены положительные результаты. При этом вирус может быть уже «мертвым», человек здоров и никому не опасен», — отмечает профессор. Для уточнения учитываются данные целого ряда дополнительных исследований, позволяющих на лабораторном уровне оценивать остроту воспалительного процесса или образование антител на стадии его завершения.

Когда делают исследование по методу ПЦР?

Полимеразная цепная реакция может быть проведена любому желающему, у которого возникли сомнения в наличии у него коронавирусной инфекции, даже при бессимптомном течении. Если вирус есть в организме человека, ПЦР-реакция увидит его. Однако технические возможности, прежде всего, не позволяют провести широкомасштабные тестирования на бесплатной основе. Направляют на тест всех, кто контактировал с заболевшими Ковидом, и по специальным медицинским показаниям:

• всех пациентов с признаками простуды или гриппа, которые недавно были гостями стран, неблагополучных по коронавирусу, и всех, кто контактировал с ними;
• людей старше 60 лет с признаками ОРВИ;
• пациентов с диагнозом пневмония, независимо от этиологии заболевания для исключения микст-инфекции;
• сердечников, больных эндокринологическими заболеваниями при признаках простуды;
• положительное экспресс-тестирование (капля крови на картридже по типу глюкометра) – тоже повод перепроверки лабораторной ПЦР-диагностикой.

Подчеркнем, что ПЦР-тест максимально эффективен, если он сделан в течение первых 7-10 дней с момента появления симптомов коронавируса.

ПЦР на коронавирус у новорожденных

Новорожденные – группа особого риска. Иммунной защиты у них практически нет, поэтому, если они инфицируются коронавирусом, то теоретически должны болеть тяжело. К счастью, сегодня случаев заражения коронавирусом у младенцев мало, практически более 80% протекает бессимптомно или в легкой форме.

Вероятно, это особенность COVID-19 и отсутствие белка-провокатора АСЕ2 на мембранах клеток у детей. В условиях пандемии ПЦР-тестирование осуществляется у младенцев на общих основаниях. Достаточно только мазка из носоглотки. Он обязателен для всех, контактировавших с заболевшими, и при наличии внезапной температуры выше 38,5°С.

Людмила Жаворонкова

Советы, как подготовиться к сдаче

Совет №2

За 2-3 часа до процедуры исключаются любые продукты, включая леденцы и карамельные конфеты.

Справка: Правила сдачи мазка на ПЦР отличаются у разных клиник, но разница незначительная. В некоторых лабораториях пациентов просят воздержаться от употребления алкогольных напитков за день до анализа.

Экспресс-анализы крови делают быстрее, но их точность ниже, по сравнению с ПЦР

Приведенные правила имеют скорее рекомендательный характер, и даже при их неукоснительном соблюдении нет гарантии получения 100% точного результата. Бывает и наоборот, что, нарушив все правила, человеку выдаются абсолютно достоверные показатели.

Стоит также отметить, что на сайте Американской ассоциации клинической химии АСС нет прямых указаний на необходимость какой-либо подготовки к сдаче ПЦР-теста.

Сколько живет коронавирус

В то же время исследователи пытаются ответить на другой важный вопрос о COVID-19: сколько времени SARS-CoV-2 может находиться в организме человека, прежде чем он станет безопасным для других? С точки зрения борьбы с пандемией, способность человека передавать вирус другому человеку помогает определить, нужно ли ему самоизолироваться. Общепринятые «14 дней» зачастую не работают — некоторые заражают других и через месяц.

В любом случае этот тест заметно облегчит жизнь в пандемию коронавируса. Его стоимость и скорость позволяют легко тестировать большие группы, и даже ежедневное тестирование людей, которые контактировали с инфицированным человеком, играет большую роль. Например, так можно периодически тестировать детей в школе.

Возможно, именно этот тест поможет быстро выявить случаи COVID-19 в реальном мире и позволит лучше понять сам вирус. Либо же нашим спасением станет вакцина от коронавируса. Но где гарантии, что ее сделают все?

Как и когда пациенты узнают о результатах?

В среднем на получение ответа при исследовании по методу ПЦР отводится от нескольких часов до двух дней. При любом результате пациента извещает медицинское учреждение, направившее его на анализ.

В случае положительного ответа принимается решение о помещении его на домашний карантин или на лечение в стационар в зависимости от тяжести протекания заболевания. Обязательно устанавливается круг лиц, с кем в ближайшее время заболевший контактировал. У них производится забор материала для проведения теста на коронавирус.

В случае отрицательного результата рекомендуется повторить тест через 4 дня от первого забора материала на анализ. Не исключается вероятность, что заражение произошло, но диагностика проведена слишком рано.

Российские тест-системы по методу ПЦР

Отечественные лаборатории активно включились в процесс разработки тестов на определение коронавирусной инфекции.

Узнать подробнее, где сдать тест на коронавирус и антитела к нему, а также о его стоимости, можете ознакомиться на этой странице.

Почему экспресс-тест на антитела может не показать заболевание на ранней стадии?

Исследование делает выводы на основе антител, поэтому лучше выявляет ослабевающую или уже побежденную организмом вирусную инфекцию, уточняют на сайте myfin.by.

Лаборатория «Синэво» поясняет, что антитела (даже те, что указывают на активную фазу заболевания) появляются не сразу, а после развития COVID-19. При этом ПЦР-тест показывает заболевание даже в инкубационном периоде.

На сайте invitro.by также пишут, что у инфицированных пациентов во время инкубационного периода и на ранних стадиях инфекции возможен отрицательный результат теста на антитела.

А вот интересная информация от производителя тестов: на сроке более 14 дней от появления симптомов процент выявления антител IgG – 96,8%, на сроке 8–13 дней – 86,4%, 3–7 дней – 26%, до 3 дней – 0%.