Проверка на иммунитет к коронавирусу

ИФА тест и иммунитет, видео

Далеко не все переболевшие коронавирусной инфекции имеют антитела, в некоторых случаях антитела не появляются, в некоторых случаях исчезают. Соответственно нет гарантий возникновения иммунитета против повторных заражений. Подробно о формирование иммунитета и разных случаях протекания коронавирусной инфекции рассказывает американский микробиолог с российскими корнями Анча (Анна) Баранова.

Наряду с качеством тестов тут кроется серьезный подвох – с учетом российской школы принятия решений, прогнозировать что либо сложно.

И подвох естественно возник:

Как проводится

Чтобы сделать анализ в Инвитро, достаточно выбрать один из расположенных близко к месту жительства пациента лабораторный центр. Кроме того, по предварительной заявке возможен выезд сотрудников лаборатории на дом к пациенту или в офис. При себе нужно иметь паспорт или другой документ для удостоверения личности.

Сдавать анализ нужно натощак; у пациента берут венозную кровь (антитела обнаруживают в ее сыворотке).

Для определения антител (иммуноглобулинов) к коронавирусу в лаборатории используют метод иммуноферментного (ИФА) и иммунохемилюминесцентного (ИХЛА) анализа. Исследования производятся с помощью сертифицированных зарубежных и российских тест-систем. В последнее время лаборатория пользуется отличающимися высокой точностью результатов отечественными тест-системами АО «Вектор-Бест».

Важно: Результат не может использоваться для самодиагностики. Только врач может установить точный диагноз, основываясь на совокупности анамнеза пациента, его клинического обследования и результатов других лабораторных и инструментальных исследований.. Если кровь для тестирования берут в офисе или на дому, пациент заранее (обычно за несколько дней до сдачи анализа) заполняет небольшую анкету

Она представляет собой опросник в виде таблицы, в которой нужно указать хронические заболевания, если они есть, и ответить на вопросы об эпидемиологическом анамнезе

Если кровь для тестирования берут в офисе или на дому, пациент заранее (обычно за несколько дней до сдачи анализа) заполняет небольшую анкету. Она представляет собой опросник в виде таблицы, в которой нужно указать хронические заболевания, если они есть, и ответить на вопросы об эпидемиологическом анамнезе.

Анкета нужна для индивидуальной оценки состояния здоровья каждого пациента и точных результатов тестирования.

Готовые результаты анализа можно забрать в лаборатории или ознакомиться с ними на сайте Инвитро в личном кабинете пациента.

Антитела есть – иммунитета нет?

Обработанные данные, собранные на основе анализа огромного количества проведенных тестов, показали неожиданный результат, который пока не получил однозначного ответа. Дело в том, что выработка специфического приобретенного иммунитета – это стандартный привычный всем результат, и повторного инфицирования хотя бы в ближайшее время по статистике не ожидается. Однако с новым коронавирусом по-другому.

Ранее исследования показали, что у большинства переболевших COVID-19 антитела образуются в достаточном количестве, но приблизительно у 6 % пациентов – иммунитет не вырабатывается. А у некоторых переболевших после выздоровления антитела были обнаружены в малых количествах, явно неспособных обеспечить достойный отпор при повторном инфицировании.

При этом последние работы ученых выявили крайне интересные особенности, что даже после исчезновения антител из крови, иммунитет к коронавирусной инфекции остается. Это происходит благодаря памяти В- и Т-лимфоцитов – иммунных клеток, отвечающих за долгосрочный иммунитет.

Ученые полагают, что эти клетки могут стать основой создания вакцин от коронавируса, а впоследствии формирования коллективного иммунитета. Т-клетки способны распознавать патогены, с которыми организм уже сталкивался на протяжении жизни и нейтрализовать их, предупреждая развитие заболевания.

Такие клетки были обнаружены в образцах крови, взятых несколько лет назад, и ученые обнаружили, что они могут бороться с новым типом коронавируса. Люди, в то время сдававшие кровь, болеть COVID-19 не могли, но подвергались заражению другими коронавирусами, однако протекали патологии лишь при наличии простудной симптоматики.

Наличие антител в крови – не повод отказываться от защитных средств. Выявив Т-клетки, реагировавшие на новый возбудитель, в старых образцах крови, ученые сделали вывод, что иммунитет, сформированный при инфицировании другими коронавирусами, способен сохраняться длительное время и защитить человека от заражения активно распространяющимся сейчас микроорганизмом.

Именно частой подверженностью различным респираторным заболеваниям эксперты объясняют, что дети обычно легко болеют COVID-19. Вероятно, подобный механизм срабатывает и у взрослых людей, сохранивших иммунитет после ранее перенесенных простуд.

Особенности тестирования на дому

Для сдачи подобного рода анализа следует заранее договориться о выезде бригады или специалиста лаборатории, имеющей лицензию на проведение диагностики коронавируса COVID-19. Есть нюанс: частные лаборатории оказывают подобную услугу только особам, у которых отсутствуют признаки ОРВИ, и платно (около 1300 рублей, не считая затраты на выезд медицинского сотрудника и забор биоматериала).

В государственных лабораториях теоретически можно сделать тест бесплатно, но только при условии нахождения в группе риска и наличия направления врача. Тест в срочном порядке рекомендован следующим лицам:

• медицинским работникам, обсуживающим пациентов с наличием/подозрением на КОВИД;
• при возникновении симптоматики КВИ (гипертермия, одышка, сухой кашель, заложенность носа, потеря обоняния и снижение работы вкусового анализатора, затрудненное дыхание), если экспресс-тест на грипп оказался отрицательным;
• лицам, не имеющим признаков КОВИД-19, но контактирующим с подтвержденным больным;
• перед перелетом и по возвращении в страну;
• при госпитализации в стационар (по любой причине) и перед проведением плановой операции.

Когда не нужно проводить экспресс-тест:

• контакт с возможным носителем инфекции был менее 5 дней назад;
• положительный результат экспресс-анализа на грипп;
• отсутствие симптоматики, хорошее самочувствие, отсутствие оснований предполагать контакт с больным коронавирусом.

Необходимый биоматериал – отделяемое с поверхности носо- и ротоглотки. Результаты готовы в течение 3-7 дней.

Как это работает?

Сначала вирусную ДНК выделяют из материала, представленного в лабораторию, денатурируют: на этом этапе двухцепочечную ДНК-матрицу нагревают до 94—96 °C, чтобы цепи ДНК разошлись. Затем добавляют так называемые праймеры — начальные звенья цепочки, которые необходимы для старта синтеза новой копии, и так называемую полимеразу — тот самый фермент, который и будет заниматься репликацией ДНК.

Схема: как ДНК-полимераза копирует каждую из цепочек ДНК по отдельности. РНК-праймер изображен белым прямоугольником в начале каждой из двух цепей

Как правило, для лабораторной ПЦР используются ДНК-полимеразы из термофильных бактерий, поскольку в течение реакции смесь многократно охлаждают и нагревают. На следующем этапе в смесь из ДНК, полимеразы и праймеров добавляются нуклеотиды — то есть строительный материал для воспроизводства, после чего емкость с нею нагревается до 37°C, и процесс запускается.

На последующей стадии элонгации полимераза начинает синтез на каждой из двух цепочек разделенной ДНК недостающей пары. Происходит это по принципу комплементарности: фермент присоединяет напротив каждого нуклеотида, из которых состоят ДНК, противоположный. По завершении реакции цикл неоднократно повторяется (см. видео ниже).

Общая схема полимераной цепной реакции. Цифрами обозначены ее этапы. 

В случае с вирусами, содержащими не «двойную» ДНК молекулу, а «одинарную» РНК (а это коронавирусы, или, например, ВИЧ), ученым приходится сначала провести обратную транскрипцию РНК с помощью фермента обратной транскриптазы, а уже потом производить амплификацию по той схеме, что была указана выше. Именно так, собственно, поступает и сам вирус, попадая в клетку, перед тем как встроить свою ДНК в человеческую и приступить к синтезу собственных белков, из которых состоит его «тело» (то есть не генетического материала, а самих вирусных частиц, при ПЦР же, наоборот, копируется генетический материал, а не новые частицы вируса).

Ингибиторы обратной транскриптазы — одни из самых распространенных видов лекарств от ВИЧ-инфекции. К ним относятся, например, зидовудин и ламивудин — самые первые препараты АРВТ, разработанные еще в 80-х.

Производится ПЦР на специальных приборах, амплификаторах, или так называемых термоциклерах (Thermal cycler).

Титрование и результаты ИФА

Существуют различные варианты ИФА; особо широко применяется твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA). По типу результата ИФА бывает качественным и количественным. Качественный показывает только наличие или отсутствие иммуноглобулинов IgG и IgM. Количественный ИФА проводится с помощью титрования. Титрование – это лабораторный метод, с помощью которого определяется количество того или иного вещества, растворенного в пробе. Оно позволяет установить концентрацию антител к коронавирусу в сыворотке крови и определить скорость развития и стадию заболевания.

Иммуноферментный анализатор – автоматизированный прибор, предназначенный для анализа уровня антител в сыворотке крови, диагностики состояния щитовидной железы и репродуктивной функции, тестирования при аллергических и онкологических заболеваниях.

Результаты количественного ИФА указываются в условных единицах (например, МЕ/мл, Ед/л. АЕ/мл и т.п.). С точки зрения терминологии, не совсем корректно называть эти результаты «титром антител». Титр – это максимальное разведение сыворотки крови, при котором еще можно выявить антитела, и выражается он в виде соотношения, например, 1:70, 1:200, 1:500 и т. п. В данном же случае речь идет о количестве антител к коронавирусу в сыворотке крови. Тем не менее, значения, полученные в результате ИФА-теста, называют титрами антител. Далее будут рассмотрены вопросы лабораторной диагностики COVID-19 с помощью ИФА именно в этом контексте.

ИФА тест коронавирус – 200000 тестов в день в Москве начиная с 15 мая

Мгновенные экспресс-тесты

В конце мая в свободную продажу поступили новые экспресс-тесты. По сообщению Росздравнадзора, с их помощью проводится скрининг, то есть данные тест-системы могут использоваться только в лабораторных условиях. Для домашнего применения они непригодны.

Они работают по принципу глюкометра – достаточно капнуть каплю крови, чтобы они показали результат через 20-30 мин. Таким способом можно узнать лишь сам факт наличия антител к Ковиду, но этого недостаточно. Необходимы дополнительные исследования для определения их количества и скорости образования.

Стоит отметить, что экспресс-тесты поставляются преимущественно в стационары и крупные медицинские центры. Ряд клиник, в частности, DRD Biotech на базе центра Сколково, ранее объявили разработку таких тестов, позволяющих проводить исследования в любом месте и без специального оборудования. Но в широкую продажу они еще не поступали.

ВОЗ не рекомендует применять экспресс-тесты на антитела к Covid-19 для диагностики из-за высокого риска получить неверный результат. Особенно это актуально для ранних стадий болезни.

Росздравнадзор, в свою очередь, выступает против использования мгновенных тест-систем вне лабораторий, дома. Специалисты предупреждают, что, как и при других типах тестов, полученные результаты следует рассматривать в контексте с другими клиническими сведениями, доступными медикам.

В ведомстве также подчеркивают, что экспресс-тесты покажут только присутствие антител в крови, более детальную информацию – количественное значение, скорость увеличения концентрации IqG и IqM – они не дают. Кроме того, подобные анализы целесообразно делать не раньше 3-го дня после возникновения симптоматики Sars-CoV-2.

Факт! Людям, не имеющим характерных симптомов, результатов экспресс-теста недостаточно, нужны дополнительные, более детальные исследования.

Где сдать

По состоянию на 1 июня 2020 г. тестирование на антитела к Covid-19 начали проводить как государственные, так и частные лаборатории. Власти Калмыкии приобрели 20 тысяч тест-систем Sars-CoV-2 Antibody Test: в числе первых анализы будут сдавать сотрудники полиции, социальных и коммунальных служб, таксисты.

Представитель Министерства здравоохранения Калмыкии Ю. Кикенов заявил, что «если иммунная прослойка будет хотя бы процентов 40, то есть шанс избежать еще одной вспышки заболевания осенью. В случае незначительной прослойки можно говорить о возможности второй волны эпидемии через конкретный временной интервал».

В Кабардино-Балкарии приоритет отдается врачам и медработникам – именно они смогут пройти тесты на антитела в первую очередь. На сегодняшний день сдать анализ на антитела к Ковиду в регионе можно только в трех частных клиниках. Цена услуги разная и может составлять 950, 1250 и 1450 р.

Лабораторная служба Хеликс

Частная сеть медлабораторий Хеликс проводит тестирование на антитела к Covid-19 с 16 мая 2020 г. Ее отделения расположены в Санкт-Петербурге и 129 городах России. Чувствительность теста превышает 95%.

Стоимость анализа не зависит от региона и составляет 1.6 тыс. р. + цена забора крови из вены. Клиника планирует делать до 10 тысяч таких тестов в день, каждый из которых занимает двое суток без учета дня сдачи крови.

Медицинские офисы Инвитро

Еще в одной частной медицинской компании, Инвитро, берут кровь на анализ в Санкт-Петербурге, Москве и Московской области, Новосибирске, Самаре и Челябинске. Цена теста – 950 р. + стоимость забора крови.

Провериться в Инвитро может любой желающий, причем направления от врача не требуется. Условие только одно – отсутствие явных признаков ОРВИ – насморка, кашля, повышенной температуры тела и/или одышки.

Федеральная сеть лабораторных отделений Гемотест

Сдача крови на антитела к Covid-19 доступна в Гемотест. Филиалы этой лаборатории работают не только в столице, но и во многих городах России. Подробный список можно посмотреть на официальном сайте.

Гемотест – это современная высокотехнологичная лаборатория, которая ежедневно выполняет десятки тысяч медицинских анализов на всей территории РФ

От местонахождения клиники не зависит, сколько стоит анализ: его цена стабильная и составляет 950 руб. + 130 руб. за забор биоматериала. Срок исполнения – 3 дня. Как и в Инвитро, здесь работает правило, согласно которому не принимаются пациенты с симптоматикой ОРВИ или подозрением на грипп. Кроме того, должны исключаться контакты с инфицированными коронавирусной инфекцией в последние две недели.

Клиника Хадасса в Сколково – Hadassah Medical Moscow

17 апреля 2020 г. тестирование на антитела к Covid-19 запустил филиал израильской клиники Hadassah Medical Moscow, расположенный на территории международного медицинского кластера Сколково.

Провериться на наличие антител в этом медучреждении можно за 5.300 р. Забор крови осуществляется из периферической вены или из пальца.

Медси

Тесты, проводимые в клиниках Медси, обладают высокой специфичностью, благодаря чему исключена вероятность получения ложноположительных результатов.

Предлагается 3 варианта тестирования:

• экпресс-тест в офисе клиники. Сдается кровь из пальца, результат известен через 20 минут. Цена анализа – 2900 р;
• обычный тест в офисе клиники. Забор крови производится из вены, готовность – через 2 дня, без учета даты взятия крови. Цена – 1800 р;
• тест на дому. Специалисты выезжают на дом к пациенту и делают анализ за 5050 р.

Факт! Сделать анализ на антитела к коронавирусу в Медси могут жители Москвы и Московской области.

Центр молекулярной диагностики CMD

Центральный НИИ эпидемиологии CMD проводит тесты на антитела к коронавирусу методом иммуноферментного анализа ИФА. Кровь берут из вены, срок исполнения составляет от одного до четырех дней, не считая даты сдачи.

Исследование доступно во всех медицинских офисах компании, которые находятся как в Москве, так и во многих крупных областных центрах. Предварительная запись не требуется. Цена услуги – 1450 р.

ВНИМАНИЕ! За три часа до взятия биоматериала рекомендуется воздержаться от приема пищи. Допускается пить негазированную воду

Подготовка к диагностике

Для получения достоверных результатов важно соблюдать правила подготовки к забору биоматериала. Перед мазком из зева и носа нельзя кушать, чистить зубы, курить и жевать резинку в течение 2 часов, на протяжении последних 30 минут не пить воду

Также на протяжении последних 2 часов рекомендуют не использовать капли/спреи в нос, горло. Если наблюдается большое количество вязкого секрета, то перед проведением мазка нужно высморкаться.

Забор венозной крови проводят утром натощак либо не ранее, чем через 6-8 часов с момента последнего приема пищи. Пить воду на протяжении этого времени можно. Если пациент принимал в течение 2 последних недель препараты, влияющие на состояние иммунной системы (Амиксин, Тилорон-С3), необходимо сообщить об этом лаборанту. Тот сделает соответствующие пометки на бланке анализа.